細(xì)胞凍存液是細(xì)胞保存和復(fù)蘇過(guò)程中不能少的重要物質(zhì),它的正確使用直接關(guān)系到細(xì)胞的活力和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
細(xì)胞凍存液的選擇須遵循幾個(gè)原則:
①細(xì)胞在凍存和溶解過(guò)程中的損傷減低到最小,細(xì)胞存活率高;
②凍存細(xì)胞復(fù)溫后,其的細(xì)胞生物學(xué)特性無(wú)明顯影響;
③細(xì)胞復(fù)溫后,低溫保護(hù)劑容易去除,成分清楚,對(duì)細(xì)胞、人體無(wú)毒副作用;
④凍存保護(hù)劑可快速起效,減少操作步驟;
⑤價(jià)格。
使用的注意事項(xiàng):
1.常規(guī)細(xì)胞凍存液配方為基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)與DMSO按9:1配制。DMSO溶于培養(yǎng)基時(shí),DMSO加入培養(yǎng)基將釋放大量熱量,所以細(xì)胞凍存液需提前配制,避免燙傷細(xì)胞。注意,不能直接在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加DMSO。
2.選擇不含DMSO的細(xì)胞凍存液時(shí),需確認(rèn)替代成分的物質(zhì)基礎(chǔ),如果替代成分較DMSO潛在危害更大,則得不償失。
3.選用不含DMOS的細(xì)胞凍存液,需確認(rèn)無(wú)細(xì)菌及細(xì)胞污染,要進(jìn)行支原體檢測(cè)。